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流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种能够对单个细胞或生物微颗粒的生物学性质进行定量分析和分选的检测手段,具有快速、高精度、高准确性、多参数和高通量等优点,是目前先进的细胞定量分析技术之一。

我国流式细胞仪的研制和流式细胞技术的应用历经30多年的发展,在临床和科研领域的应用都发挥了非常重要的作用。

目前我国FCM应用领域主要集中在下列方面(在此仅列出部分代表项目):

(1)免疫学领域:淋巴细胞亚群检测,用以评估机体的免疫状态、辅助疾病如AIDS/HIV的诊断等,是目前各医疗单位开展和应用最广泛的项目。

(2)血液学领域:主要是血液系统疾病的免疫分型及白血病微小残留病变(minimal residual disease,MRD)监测,用于血液系统疾病的诊断、治疗评估和复发监测。FCM的细胞免疫分型是国际公认的诊断造血细胞疾病必不可少的重要标准之一,是目前被广泛接受和认可的免疫分型方法。

(3)临床肿瘤学:主要是DNA倍体和细胞周期分析,了解细胞DNA倍体和增殖能力,异常倍体的出现意味着DNA合成的异常,可能是肿瘤或是癌前病变发生的重要标志。

(4)造血干细胞移植的应用:足够数量的造血干细胞是造血干细胞移植成功的关键因素之一,通过CD34标记和细胞计数微球同时使用,或者具有计数功能的流式细胞仪是鉴定和计数造血干细胞的快速、准确、定量的方法。

它在这么多领域都发挥重要作用,那么到底什么是流式细胞术呢,稍安勿躁啦,看完下面这段内容,你就不再是一头雾水了。

  • 首先,流式细胞检测要给不同的细胞标记上不同的荧光标记物;
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  • 然后,让细胞们一个个排队通过流式细胞仪的激光;
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因为提前标记了荧光标记物嘛、不同的细胞各自发出他们绚烂的荧光,这样就可以被流式细胞仪采集到。

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(大致就是这样一个路径)

所以流式细胞检测可以应用于所有富含细胞的标本,什么血液、骨髓、脑脊液、胸水、腹水都不在话下。

流式细胞检测和血液系统疾病分型

有什么关系呢?

简单来说,血液头的细胞也是有不同来源的,什么红细胞系统、粒细胞系统、淋巴细胞系统、单核细胞系统、浆细胞系统、巨核细胞系统等,来源于不同系统的正常细胞和异常细胞都有不同的特点,流式细胞检测这个技术手段就可以区分不同系统细胞的特点。

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流式细胞检测正是通过荧光抗体,来把坏蛋细胞找出来!

1例胸水流式细胞术

在肿瘤精准检测中发挥的作用!

一名在外院诊断为右侧胸腔积液,怀疑右肺恶性肿瘤的患者到我院外科就诊。临床医生按照入院常规检测为患者申请了胸水常规、胸水生化、胸水细胞学等检查,但是都不能明确诊断。随后行胸膜活检术,取组织标本进行病理检测。但是,由于患者胸膜组织标本较少,病理诊断仅能得出不排除淋巴瘤的结论。

那这个患者到底是不是淋巴瘤呢?

不知道!

还说不清楚哦……

那咋办呢?

找检验科医生咯!

流式细胞检测上场!

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通过前面提到的荧光标记,就把“好”细胞、“坏”细胞认出来!这就是流式细胞检测的作用!

流式细胞检测特别适合于那些怀疑是淋巴造血系统肿瘤但是却不能明确诊断的患者。

体液白血病/淋巴瘤免疫分型有什么意义呢?

从刚才分享的病例里,大家也可以看出这个项目就是采用流式细胞术的方法来辅助诊断白血病、淋巴瘤,这个项目具有快速、准确、标本容易采集、创伤小等特点,对于诊断不明确而又有大量胸腔、腹腔积液的患者,此项检查不失为好的选择之一。

近期,一项研究里,研究人员开发了一种使用大规模流式细胞术追踪外泌体的细胞分布的有效方法,并且首次通过高度多变量细胞表型串联装载重金属试剂,成功地定量了单细胞水平体内外泌体的命运。使用电穿孔技术,研究人员将包含质谱流式细胞术可检测到的同位素探针离子的核酸嵌入剂装载到外泌体中,并检测了质谱流式细胞筛选吸收这些外泌体的单个细胞中这些离子的能力。这项研究在单细胞水平上评估了外泌体的命运,为体内的外泌体功能提供了有价值的见解,并促进了基于外泌体的治疗方法的改进。

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在单细胞水平上进行的外泌体摄取分析

本文整理于四川省肿瘤医院/检验星空/检验之声等平台

参考文献:Wang J, Tu C, Zhang H, et al. Loadingof metal isotope-containing intercalators for mass cytometry-based high-throughputquantitation of exosome uptake at the single-cell level. Biomaterials. 2020; 255:120152.

http://www.lbrq.cn/news/1456939.html

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