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【化工仪器网 政策标准】数字PCR是一种核酸分子绝对定量技术，主要采用当前分析化学热门研究领域的微流控或微滴化方法，将大量稀释后的核酸溶液分散至芯片的微反应器或微滴中，每个反应器的核酸模板数少于或者等于1个。这样经过PCR循环之后，有一个核酸分子模板的反应器就会给出荧光信号，没有模板的反应器就没有荧光信号。根据相对比例和反应器的体积，就可以推算出原始溶液的核酸浓度。
近些年来，随着数字PCR技术的不断发展，Bio-Rad、LIFE Technologies及RainDance等厂家相继推出技术较为成熟的数字PCR产品。如今，分子生物学技术也在迅猛发展，各实验室数字PCR仪数量迅速增加，这些仪器除了被用于基础科研外，还被广泛地用于第三方医学实验室、出入境和疾控中心的样品检测。
根据《ISO/IEC 17025:2005 检测和校准实验室能力的通用要求》，检测校准实验中使用的分析设备都应当经过检定或校准，以保证仪器的准确性和测定结果的可溯源，从而保证各个检测和校准实验室在不同时间、不同地点测定结果的准确、可比。数字 PCR仪由于没有检定规程或者校准规范，无法对仪器进行检定校准，已经成为当前实验室认可工作中的瓶颈之一。
有鉴于此，近日，由全国生物计量技术委员会对口负责的《数字PCR仪校准规范》征求意见稿已经起草完成，并面向全社会公开征求意见。该项新的校准规范的主要内容包括范围、引用文件、术语和计量单位、概述、计量特性、校准条件、校准项目和校准方法、校准结果表达和复校时间间隔等，适用于微滴式、芯片式和微孔式数字聚合酶链反应分析仪计量性能的校准，对于其它类型的数字PCR仪，也可参照本规范执行。
数字PCR仪的计量特性有温度示值误差、温度均匀度、升降温速率、拷贝数浓度重复性、荧光强度重复性等，具体内容如下表1所示：
仪器校准的环境条件为：实验室环境应满足仪器安装的要求，不得存在强烈的机械振动和电磁干扰，校准时实验室温度应当控制在(15~30)℃，相对湿度不大于 70%。另外，校准时的测量标准及其他设备有标准物质、温度校准装置、电子天平、移液器以及配制校准用标准物质所需纯水。需要注意的是，校准前需将数字PCR仪开机预热30min，确保仪器达到正常工作状态。
以上校准规范为首次发布，在制定过程中主要参考了JJF1527-2015 《聚合酶链反应分析仪校准规范》。